層析與電泳方法

保留比

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想像兩名跑者去追一條自身也在向前滑動的終點線。一個跟得比另一個緊,於是我們用各自跑過的、占終點線行進距離的比例來描述他們。在薄層層析中,那條「終點線」就是沿板爬升的溶劑前沿,而保留比記錄的是斑點行進的距離與該前沿相比有多遠。

嚴格地說,平面層析中某斑點的保留比(Rf)等於斑點自起始線移動的距離,除以同一時間內溶劑前沿移動的距離。它總是 0 到 1 之間的一個數:幾乎不動的化合物 Rf 接近 0,而走得幾乎和溶劑一樣遠的 Rf 接近 1。由於兩段距離都在同一塊板上測量,這個比值抵消了溶劑恰好爬升多遠的小差異。

它之所以重要,是因為 Rf 是一種簡單、可重複地描述和比較化合物落點的方式,可通過把某物質的 Rf 與並排跑的已知標準相匹配,來幫助確認它的身份。它誠實的告誡是:Rf 只在條件一致時才可重複——同樣的板型、溶劑、溫度和飽和度——所以它是某一實驗室裝置內有用的指紋,而非一個絕對、可移植的常數。

在一塊顯色後的 TLC 板上,化學家測得某斑點上升了 3.6 公分,而溶劑前沿上升了 8.0 公分,得 Rf 為 0.45——這與並排跑的標準樣品一致,從而確認了該化合物的身份。

斑點距離除以溶劑前沿距離:一個 0 到 1 之間的數。

不要把這個 Rf(平面層析的保留比,介於 0 和 1 之間)與柱層析的保留因子 k 混淆,後者是另一個量,可以遠大於 1。

又稱
Rf value比移值retention factor (TLC)