層析與電泳方法
離子交換層析
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想像一個掛鉤都帶正電的衣帽架。讓一群客人經過它:戴負電徽章的被勾住、被留下,其餘的則徑直走過。給它一個誘人的替代品,把一類戴徽章者換成另一類,衣帽架就放開舊的所獲。離子交換層析正是這樣分離帶電物種的——靠它們與異號電荷位點黏附的牢固程度。
嚴格地說,離子交換層析用一種鑲嵌著固定帶電基團的固定相來分離離子和帶電分子。帶異號電荷的樣品離子結合到這些位點上;隨後,流過的流動相中競爭性離子或變化的 pH 把它們逐批逐批地置換下來。結合得弱的先走,被牢牢抓住的後走。
它之所以重要,是因為它是處理其他方法難以應付的帶電物種的主力——胺基酸、蛋白質、無機陰陽離子,以及硝酸根、氯離子等水質離子。它誠實的告誡是:分離依賴電荷,因此它不易區分同號電荷且結合相近的兩種物種,而樣品中過高的鹽或極端 pH 會淹沒結合位點、毀掉分離。
環境實驗室把過濾後的河水樣品泵過陰離子交換柱;氟離子、氯離子、硝酸根和硫酸根各在自己的鹽濃度下被釋放,呈現為分開的峰,報告水中每種陰離子的含量。
帶電位點抓住異號離子,再一組一組地把它們放開。
陽離子交換劑帶固定的負基團、保留正離子;陰離子交換劑帶固定的正基團、保留負離子——樹脂的電荷與它所捕獲的離子相反。
又稱
另見