取樣與樣品製備
衍生化(derivatization)
/ dih-RIV-uh-ty-ZAY-shun /
衍生化,是給一個儀器很難看清的分子做化學「裝扮」——在它身上接一個小小的化學標籤,讓它更容易被檢測、或更順利地通過儀器。想像一個在人群中很難一眼認出的人;給他別上一枚醒目的徽章,他立刻就顯眼了——衍生化給待測物別上一枚化學徽章,正是出於同樣的道理。
具體而言,是讓待測物與選定的試劑反應,生成一種在該方法中表現更好的新化合物——即衍生物。這個標籤可能為分子添上顏色或螢光,好讓檢測器看見它;可能把一種頑固、不揮發的化合物變得足夠揮發,好讓它在氣相層析裡穿行;也可能改善它與相鄰物質分離得有多乾淨。
這是一種強有力的手段,能把那些本來「看不見」或「不配合」的待測物,帶進某項技術夠得著的範圍內。但需留意的也實實在在:反應必須基本進行完全、且可重複,否則它會引入自己的誤差;它帶來額外的試劑、時間和可能的汙染;而且衍生物必須足夠穩定,撐到測量完成。
胺基酸本身沒有可用的顏色,所以在做高效液相層析前,分析員讓它們與一種螢光標籤反應;這樣每個帶標籤的胺基酸都會在檢測器下發光,呈現為一個清晰的峰。
一個化學標籤,讓看不見的待測物在檢測器前顯眼起來。
衍生化可以在分離之前做(管柱前),也可以在分離之後做(管柱後)。管柱前衍生在選擇試劑上更自由,但衍生物本身必須挺過整個分離過程;管柱後衍生則在檢測前一刻給一切都貼上標籤,沒有時間發生漂移,代價是需要額外的管路系統。
又稱
另見