基因工程与重组DNA

转化

转化指的是这样一个时刻:一个细胞吞下周围环境中一段裸露的DNA,从而在遗传上改变了自己。一个摄取了携带抗生素抗性基因质粒的细菌就被转化了:它如今拥有了片刻之前还没有的一种能力。

在实验室里,转化是把改造好的质粒送进宿主细胞的关键步骤。通常要先让细菌变得感受态——被诱导进入易接受的状态——办法是化学处理,或是用短促的电脉冲(电穿孔)在膜上暂时打开小孔。DNA趁机进入,随后利用可选择标记鉴定出摄取了目标质粒的细胞,于是只有被转化的细胞才能在选择培养基上生长。

转化在自然界中也会发生:有些细菌很容易从环境中摄取DNA,包括来自死去邻居的DNA,这正是基因(以及抗生素抗性)在微生物之间传播的一种途径。从历史上看,人们发现一种无害细菌竟能被来自死去致病菌的DNA转化成致病菌,这是一条关键线索,表明遗传物质是DNA而非蛋白质。

经过一次热激步骤后,把一管细菌涂布在含有抗生素的培养皿上;只有摄取了带抗性质粒的细胞才能存活、长成菌落。

抗生素筛选只让被转化的细胞生长,从而便于把它们挑出来。

转化指的是细菌、真菌或植物细胞摄取DNA;把DNA导入动物细胞通常称为转染,而由病毒来递送则称为转导。

又称
bacterial transformation细菌转化細菌轉化