基因工程与重组DNA

分子克隆

当生物学家说他们克隆了一个基因时,并不是指他们复制出了一整只动物,而是指他们制造了某一段DNA的许多完全相同的拷贝。分子克隆就是这样一个过程:取来单个DNA片段,在活细胞内产生大量纯净的同一片段群体。

经典流程分几步。先把一个DNA片段连接到载体上,做成重组分子;再通过转化把这个分子导入宿主细胞,通常是细菌;然后培养这些细胞,让每个细胞把载体传给它的所有后代;最后鉴定并挑选出携带目标插入片段的菌落。由于一个菌落里的每个细胞都源自同一个始祖,被克隆DNA的所有拷贝都完全相同。

克隆给了研究者一样宝贵的东西:一份可再生、纯净、特定DNA序列的供应,可用于测序、突变、表达或研究。虽然PCR如今已能在试管里不靠细胞就扩增DNA,但当你需要把DNA长期维持、忠实复制,或在活宿主中表达为蛋白质时,基于细胞的分子克隆仍然不可或缺。

一个携带重组质粒的细菌经过一夜培养,长成一个由数百万细胞组成的菌落,每个细胞都持有被克隆基因的同一份拷贝。

一个始祖细胞,一个菌落,数百万份相同的DNA拷贝。

分子克隆复制的是一段DNA片段,而不是一个生物体。它与生殖性克隆(如多利羊那样)无关,后者是从单个细胞复制出一个完整的个体。

又称
DNA cloningDNA克隆DNA選殖