基因工程与重组DNA
DNA文库
DNA文库正如其名所示:它是一份收藏,就像一架摆满书的书架,每一本“书”都是一段不同的克隆DNA片段,而它们合在一起,代表着某样东西的全部——一个生物的基因组,或它当时正在表达的所有基因。你手里握着的不是一个基因,而是一整座可供检索的档案库。
构建文库时,先把源DNA打断成许多片段,把每个片段插入一个载体,再把这些重组载体导入宿主细胞。每个宿主细胞携带一个片段,于是整群细胞合在一起就保存了全部收藏。基因组文库由染色体DNA制成,代表完整的基因组;而cDNA文库由信使RNA制成(经由逆转录酶),只代表源组织中当时活跃的基因。
文库的意义在于检索。研究者可以用探针筛选,或通过测序,从中找到携带目的基因的那一个特定克隆,然后培养该克隆,获得这个基因的纯净拷贝。在全基因组还无法廉价测序的年代,文库是从浩瀚基因组中“钓出”单个基因的主要手段;如今它们在克隆、筛选和功能研究中仍然有用。
为了寻找一个肝脏特异的基因,研究者去筛选一个由肝组织制成的cDNA文库,因为只有在肝脏中活跃的基因才会出现在它的克隆当中。
cDNA文库捕捉的是某种组织当时实际用到的基因。
基因组文库包含内含子和非编码DNA,因为它直接来自染色体;而cDNA文库只反映剪接后、被表达的转录本,因此只含外显子而不含内含子。
又称
另见