基因工程与重组DNA

逆转录酶

遗传信息通常的流向是从DNA到RNA。逆转录酶把这支箭头倒了过来:它是一种酶,能读取一条RNA链,并据此合成一条相匹配的DNA链。这条由RNA得来的DNA拷贝称为互补DNA,即cDNA。

这种酶最初是在逆转录病毒中发现的,比如HIV,它们以RNA形式携带基因,必须把基因转换成DNA才能整合进宿主的基因组——逆转录酶正是它们做到这一点的途径。它的存在表明,遗传信息的流向并非严格的单向,这是对中心法则的一项重要补充,而不是对它的否定。

作为一种实验室工具,逆转录酶极为宝贵,因为它让研究者能把RNA转换成稳定、好用的DNA。把细胞的信使RNA转成cDNA,正好捕捉到了哪些基因当时是活跃的,并得到不含内含子的序列,可直接用于克隆或测量基因表达。把逆转录与PCR结合(即RT-PCR),是检测和定量特定RNA的标准方法,从研究到诊断处处可见。

为了检测一种RNA病毒,检测先用逆转录酶把病毒RNA复制成cDNA,再由PCR对其进行扩增并加以显示。

逆转录把脆弱的RNA变成PCR可以扩增的DNA。

由逆转录酶制成的cDNA不含内含子,因为它是从已经剪接好的信使RNA复制而来的;这也是为何要在细菌中表达真核基因时用的是cDNA而非基因组DNA的原因之一。

又称
RNA-dependent DNA polymerase反转录酶逆轉錄酶