基因工程与重组DNA

黏性末端

黏性末端是指留在DNA片段切口处、悬垂着的短单链突出部分——几个碱基长的、没有配对的小尾巴。之所以叫“黏性”,是因为这些尾巴会与任何带有互补突出的DNA末端碱基配对,从而抓住对方,就像两条魔术贴“咔哒”一声扣在一起。

它们产生于某些限制性内切酶以交错、错位的方式(而非笔直一刀齐切)切开DNA的两条链。这种错位使每个片段都带有一小段单链。关键在于:被同一种酶切过的每个片段都带有相同的突出,因此任意两个这样的片段——哪怕来自截然不同的生物——其末端都能彼此契合。

正是这种相互匹配,使黏性末端在构建重组DNA时极为有用。当一个基因和一个载体被同一种酶切开时,它们互补的突出会彼此找到对方,靠碱基配对把片段固定在一起,将它们摆放得恰到好处,供DNA连接酶封合接口。平末端,即笔直齐切、不带突出的末端,也能连接,却缺少黏性末端提供的那种便利的预先对齐。

EcoRI在它切出的每个片段上都留下一个四碱基的AATT突出,因此一个人类基因和一个细菌质粒只要都用EcoRI切过,就能在彼此匹配的尾巴处扣合在一起。

同一种酶产生的相同突出,让毫不相干的DNA也能连接。

来自同一种酶的黏性末端可以互换,这很方便,但也没有方向性——一个片段可能以任一朝向插入;研究者常常使用两种不同的酶,来迫使片段按选定的方向插入。

又称
cohesive ends黏端黏端