基因工程與重組DNA
轉化
轉化指的是這樣一個時刻:一個細胞吞下周圍環境中一段裸露的DNA,從而在遺傳上改變了自己。一個攝取了攜帶抗生素抗性基因質體的細菌就被轉化了:它如今擁有了片刻之前還沒有的一種能力。
在實驗室裡,轉化是把改造好的質體送進宿主細胞的關鍵步驟。通常要先讓細菌變得勝任態——被誘導進入易接受的狀態——辦法是化學處理,或是用短促的電脈衝(電穿孔)在膜上暫時打開小孔。DNA趁機進入,隨後利用可選擇標記鑑定出攝取了目標質體的細胞,於是只有被轉化的細胞才能在選擇培養基上生長。
轉化在自然界中也會發生:有些細菌很容易從環境中攝取DNA,包括來自死去鄰居的DNA,這正是基因(以及抗生素抗性)在微生物之間傳播的一種途徑。從歷史上看,人們發現一種無害細菌竟能被來自死去致病菌的DNA轉化成致病菌,這是一條關鍵線索,表明遺傳物質是DNA而非蛋白質。
經過一次熱激步驟後,把一管細菌塗布在含有抗生素的培養皿上;只有攝取了帶抗性質體的細胞才能存活、長成菌落。
抗生素篩選只讓被轉化的細胞生長,從而便於把它們挑出來。
轉化指的是細菌、真菌或植物細胞攝取DNA;把DNA導入動物細胞通常稱為轉染,而由病毒來遞送則稱為轉導。
又稱
另見