基因工程與重組DNA

黏性末端

黏性末端是指留在DNA片段切口處、懸垂著的短單鏈突出部分——幾個鹼基長的、沒有配對的小尾巴。之所以叫「黏性」,是因為這些尾巴會與任何帶有互補突出的DNA末端鹼基配對,從而抓住對方,就像兩條魔鬼氈「咔噠」一聲扣在一起。

它們產生於某些限制酶以交錯、錯位的方式(而非筆直一刀齊切)切開DNA的兩條鏈。這種錯位使每個片段都帶有一小段單鏈。關鍵在於:被同一種酶切過的每個片段都帶有相同的突出,因此任意兩個這樣的片段——哪怕來自截然不同的生物——其末端都能彼此契合。

正是這種相互匹配,使黏性末端在構建重組DNA時極為有用。當一個基因和一個載體被同一種酶切開時,它們互補的突出會彼此找到對方,靠鹼基配對把片段固定在一起,將它們擺放得恰到好處,供DNA連接酶封合接口。平末端,即筆直齊切、不帶突出的末端,也能連接,卻缺少黏性末端提供的那種便利的預先對齊。

EcoRI在它切出的每個片段上都留下一個四鹼基的AATT突出,因此一個人類基因和一個細菌質體只要都用EcoRI切過,就能在彼此匹配的尾巴處扣合在一起。

同一種酶產生的相同突出,讓毫不相干的DNA也能連接。

來自同一種酶的黏性末端可以互換,這很方便,但也沒有方向性——一個片段可能以任一朝向插入;研究者常常使用兩種不同的酶,來迫使片段按選定的方向插入。

又稱
cohesive ends黏端黏端