基因工程與重組DNA
反轉錄酶
遺傳信息通常的流向是從DNA到RNA。反轉錄酶把這支箭頭倒了過來:它是一種酶,能讀取一條RNA鏈,並據此合成一條相匹配的DNA鏈。這條由RNA得來的DNA拷貝稱為互補DNA,即cDNA。
這種酶最初是在反轉錄病毒中發現的,比如HIV,它們以RNA形式攜帶基因,必須把基因轉換成DNA才能整合進宿主的基因組——反轉錄酶正是它們做到這一點的途徑。它的存在表明,遺傳信息的流向並非嚴格的單向,這是對中心法則的一項重要補充,而不是對它的否定。
作為一種實驗室工具,反轉錄酶極為寶貴,因為它讓研究者能把RNA轉換成穩定、好用的DNA。把細胞的信使RNA轉成cDNA,正好捕捉到了哪些基因當時是活躍的,並得到不含內含子的序列,可直接用於選殖或測量基因表達。把反轉錄與PCR結合(即RT-PCR),是檢測和定量特定RNA的標準方法,從研究到診斷處處可見。
為了檢測一種RNA病毒,檢測先用反轉錄酶把病毒RNA複製成cDNA,再由PCR對其進行擴增並加以顯示。
反轉錄把脆弱的RNA變成PCR可以擴增的DNA。
由反轉錄酶製成的cDNA不含內含子,因為它是從已經剪接好的信使RNA複製而來的;這也是為何要在細菌中表達真核基因時用的是cDNA而非基因組DNA的原因之一。
又稱
另見