基因工程與重組DNA

DNA文庫

DNA文庫正如其名所示:它是一份收藏,就像一架擺滿書的書架,每一本「書」都是一段不同的選殖DNA片段,而它們合在一起,代表著某樣東西的全部——一個生物的基因組,或它當時正在表達的所有基因。你手裡握著的不是一個基因,而是一整座可供檢索的檔案庫。

構建文庫時,先把源DNA打斷成許多片段,把每個片段插入一個載體,再把這些重組載體導入宿主細胞。每個宿主細胞攜帶一個片段,於是整群細胞合在一起就保存了全部收藏。基因組文庫由染色體DNA製成,代表完整的基因組;而cDNA文庫由信使RNA製成(經由反轉錄酶),只代表源組織中當時活躍的基因。

文庫的意義在於檢索。研究者可以用探針篩選,或透過定序,從中找到攜帶目的基因的那一個特定選殖株,然後培養該選殖株,獲得這個基因的純淨拷貝。在全基因組還無法廉價定序的年代,文庫是從浩瀚基因組中「釣出」單個基因的主要手段;如今它們在選殖、篩選和功能研究中仍然有用。

為了尋找一個肝臟特異的基因,研究者去篩選一個由肝組織製成的cDNA文庫,因為只有在肝臟中活躍的基因才會出現在它的選殖株當中。

cDNA文庫捕捉的是某種組織當時實際用到的基因。

基因組文庫包含內含子和非編碼DNA,因為它直接來自染色體;而cDNA文庫只反映剪接後、被表達的轉錄本,因此只含外顯子而不含內含子。

又稱
gene library基因文库基因文庫