苗頭辨識與篩選
苗頭確認
初篩給你的是一份嫌疑人名單,而非真兇名單。苗頭確認就是把二者區分開的偵查工作:在更嚴格的條件下複測看似的苗頭,確保其活性真實、可重複,且是由化合物真正作用於標靶所致——而非出於偶然、誤差或假象。
確認通常會疊加幾道檢查。用新鮮的材料複測苗頭以確認可重複性;做完整的濃度梯度以確認正常的劑量響應(真苗頭隨化合物增多而增強,假象往往不會);核實化合物的身份與純度,因為活性可能來自雜質;並用不同檢測方法的正交檢測法確認該效應不是原始讀出的假象。
反向篩選和生物物理方法進一步核查化合物是否直接且選擇性地結合標靶,而非透過聚集、反應性或脫靶效應起作用。只有挺過這一連串關卡的化合物才配稱「確認苗頭」,才值得投入藥物化學的力量。跳過或倉促進行確認,正是專案耗費數月追逐從未真實存在的分子的根源。
在1200個初篩苗頭中,只有140個能重現、給出乾淨的IC50、通過純度品管並在正交檢測法中得到確認;這些成為交給化學團隊的確認苗頭。
確認把含雜訊的初篩清單過濾成一組可信的真苗頭。
判定真苗頭的關鍵檢驗,是用新稱量、查過純度的樣品做出乾淨的濃度—響應曲線。沒有劑量響應,或在重新供樣後活性消失,正是假象的標誌。
又稱
另見