層析與電泳方法

柱層析

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想像把一份渾濁的混合物緩緩倒進一根裝滿濕沙的高玻璃管頂部,再往下淋清水。黏著沙子的部分慢慢下沉,鬆散保留的部分則更快沖下,於是等一切從底部滴出時,各部分已分開。這就是最簡單、最動手的柱層析。

嚴格地說,柱層析靠把溶於流動相的混合物向下通過一根裝有固體固定相的豎管來分離它:每種成分按與填料相互作用的強弱被滯留;弱保留的成分向下行進、先流出,強保留的較晚。化學家把從底部流出的液體逐份收集,每份富集不同的成分。

它之所以重要,是因為它是真正用來純化和收集物質——而不僅是分析——的經典、可放大的辦法,從教學實驗室到工業分離無不以它為基礎。它誠實的告誡是:簡單的重力流形式既慢、分辨率又一般;關係密切的化合物可能糊在一起,這正是後來開發加壓、細填料形式(如 HPLC)的原因。

合成完成後,化學家把粗產物上樣到矽膠柱上並用溶劑沖提;想要的亮黃色色帶先於雜質向下移動,她收集含它的組分,得到純化合物。

把混合物倒下一根填充管,再隨其滴出收集分開的各部分。

氣相層析和液相層析嚴格說都是柱技術;不過在日常實驗室用語中,「柱層析」通常指用來純化的那種敞口、靠重力或低壓進料的玻璃柱。

又稱
柱色谱法column chromatography (preparative)