活性代谢物捕获

活性代谢物是机体分解药物时生成的短寿命、化学性质活泼的分子;它们太不稳定,无法直接捕捉。活性代谢物捕获是一种间接捕捉它们的实验技巧:你加入一种带黏性的“诱饵”分子,在任何活性物种刚一生成时就将其抓住,把它固定成一种稳定、可检测的产物。

在典型实验中,药物与能进行代谢的肝微粒体或细胞一起孵育,同时加入捕获剂,例如谷胱甘肽(它模拟了活性代谢物本会去攻击的蛋白亲核基团)。如果生成了活性代谢物,它们便与捕获剂结合,所形成的加合物可由质谱检测并鉴定。有时还会用氰化物来捕获另一类活性中间体。

发现被捕获的加合物会提示潜在的毒性风险,因为活性代谢物与肝损伤和特异质性反应有关,同时也指明分子的哪个部位正被活化。这一线索能帮助化学家重新设计有问题的子结构。需要提醒的是,阳性捕获结果提示的是一种危害,而非必然造成伤害:实际风险还取决于剂量、清除率以及在真实情况下生成多少活性代谢物。