色谱与电泳方法

电泳

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把气球在头发上蹭一蹭,它就能把带电的小纸屑拽过桌面。现在想象那种拉力被稳稳地、温和地施加在一块湿果冻上,带电分子朝一端漂移。电泳就是这个念头的实用化:一个持续的电场推动带电分子穿过某种介质,让它们边走边被分类。

严格地说,电泳是带电粒子或分子在外加电场下穿过流体或凝胶的迁移。每种物种以其电荷、尺寸、形状及介质阻力所决定的速度朝异号电极移动;在筛分凝胶中,较小的分子更易穿行、抢在较大的之前,于是混合物散开成分开的条带。

它之所以重要,是因为它是按大小或电荷分离蛋白质、DNA 和 RNA 的基石技术——是 DNA 指纹、基因组测序及无数生物学和临床检验的基础。它诚实的告诫是:经典平板凝胶形式可能慢、且略显手工,分辨率依赖于精心匹配的凝胶和缓冲液,而电流产生的热必须加以控制才能保持条带清晰。

遗传学实验室把 DNA 片段加到琼脂糖凝胶一端的加样孔中并接通电压;半小时里,带负电的片段朝正极缓缓移动,最小的跑得最远,在紫外光下形成阶梯状的条带。

电场驱使带电分子行进穿过凝胶,按大小和电荷把它们分开。

这个名字结合了“electro”(电)与希腊语“phoresis”(运送),字面意为“靠电运送”——很好地描绘了带电分子被电场摆渡的情景。

又称
电泳電泳gel electrophoresis