扩增、测序与核酸分析
数字PCR（digital PCR）
/ dPCR /
假设你想精确数清一份样品里到底有多少个目标分子——不是“大约是另一管的两倍”，而是一个真实的数目。定量PCR在这件事上很吃力，因为它是对照曲线读亮度的。数字PCR走了一条更聪明的路：它不去测一个整体反应，而是把样品分成成千上万个彼此独立的微小反应，然后单纯地数有多少个亮了起来。
样品被分隔开来，常常是分成油中成千上万乃至上百万个微小水滴，或芯片上的许多微孔，使每个分隔单元平均只含零个或一个目标分子。然后PCR在所有分隔单元里同时进行。含有目标分子的单元扩增后发出阳性的光；空的单元保持黑暗。你数阳性单元的数目。由于分子基本是随机分布的，借助一点统计学（泊松分布，用以校正少数恰好分到两个分子的单元），就能把发光单元的比例换算成起始分子的绝对数目——无需标准曲线。
数字PCR在qPCR薄弱的地方大放异彩：它给出绝对计数，对微小差异更精确，也更耐受抑制物，因为每个分隔单元都是各自干净的反应。这种精确性在从数千个正常DNA分子中找出一个稀有突变分子时很重要——例如血样里少数几个肿瘤DNA片段（液体活检）——或用于测量精确的拷贝数。代价是成本更高、需要专门仪器，所以数字PCR留给那些真正需要其准确度的任务，而非用作qPCR的日常替代品。
一份血样被分成2万个水滴并运行。若有200个水滴发光，统计学（计入分到两个分子的水滴）估计原始样品含有接近200个目标分子——这是一个绝对计数，直接报出，无需与任何参照曲线比较。
数发光的分隔单元，得到分子的绝对计数。
数字PCR“数阳性”的逻辑之所以能给出绝对数目，正是因为分子在众多分隔单元中随机分布——它依靠的是这种随机分配的泊松统计，而非任何标准曲线，这恰恰是它比qPCR更精确的原因。
又称
另见