蓝白筛选（blue-white screening）

转化之后，你的抗生素平板上布满了菌落——但有些携带的是带你插入片段的载体，有些携带的是没装上插入片段、只是自己重新闭合的空载体。你需要一种快速的视觉方法来分辨二者。蓝白筛选把这个问题变成了一种颜色：重组菌落长成白色，空载体菌落长成蓝色。

这个把戏用到了lacZ基因，其蛋白（β-半乳糖苷酶）能把一种叫X-gal的无色实验试剂分解成鲜蓝色的产物。载体带有lacZ的前段，而多克隆位点恰好嵌在那段片段内部。如果载体是空的，lacZ保持完整，酶起作用，菌落在含X-gal的平板上变蓝。但如果你的插入片段被连接进了克隆位点，它就打断了lacZ，酶被破坏，X-gal保持无色，菌落长成白色。于是看一眼平板就能给菌落分类：白色意味着“有插入片段”，蓝色意味着“空载体”。

蓝白筛选是单靠选择无法提供的那道经典的第二层过滤。选择（抗生素）告诉你细胞有载体；蓝白筛选告诉你那个载体是否真的带有插入片段。你挑出白色菌落去扩大培养并进一步分析。它快速、廉价、直观——但并不完美：一个不破坏阅读框的插入片段，或一个很小的插入片段，有时会让lacZ部分仍能工作，给出误导性的浅蓝菌落，所以白色菌落仍需用其他方法确认。