感受态细菌的转化（transformation）

你已经在试管里造好了重组质粒。现在你需要一座活的工厂来复制它——可细菌细胞通常不会让游离的DNA穿过它的细胞壁进来。转化就是细菌从周围环境中吸收DNA的那一步，而“感受态”细菌则是经过特殊处理、愿意接受DNA的细胞。

多数细菌并不擅长天然吸收DNA，所以实验室把它们制成感受态——乐于接纳DNA。经典的化学方法是把大肠杆菌浸在冰冷的氯化钙中，这有助于带负电的DNA贴附到细胞表面；随后短暂的42摄氏度热激把一部分DNA猛地推过膜。另一种方法是电穿孔，施加一个快速的高压脉冲，在膜上打出短暂的孔，让DNA溜进去。无论哪种方式，真正吸收质粒的细胞都只占一小部分，但由于一个被转化的细胞一夜之间就会分裂成数百万个一模一样的后代，即使成功率很低，也能给你大量携带你构建物的细胞。

转化是从试管化学通向活体生物学的桥梁——你改造的DNA进入一个能复制它的细胞的那一刻。转化之后，你把细胞涂在选择性平板上，让质粒上的选择性标记只允许被转化的细胞长成菌落。每个菌落都是一个克隆：源自同一个原始细胞的纯种群，全都携带着你的质粒的相同拷贝。