苗頭辨識與篩選

表面電漿子共振

表面電漿子共振(SPR)是一種即時觀察分子貼上標靶又鬆開的方法,無需給分子附加任何標籤或標記。可以想像一個靈敏到能感知微小額外重量的感測表面:每當有東西結合到固定在其上的蛋白上,它就感覺到那一點點重量;當那東西離開時,又感覺到重量被卸下。

在物理上,標靶蛋白被固定在鍍有薄金層的感測晶片上,被測化合物的溶液流過它。結合改變了表面的質量,從而改變了金膜中電子(電漿子)吸收光的角度。儀器把這一變化記錄成即時曲線:化合物結合時訊號上升(結合),解離時訊號下降(解離)。

由於它直接且隨時間地觀察結合,SPR得到的不僅是化合物是否結合、結合得多緊(親和力),還有它結合與解離的快慢——結合與解離的動力學,以及駐留時間。這使它成為片段篩選和苗頭確認的主力,在這些場合,確認一個真實、直接的結合事件及其動力學比單一的活性數值更重要。它的侷限在於固定蛋白可能擾動蛋白,而極弱或極非特異的結合物需要謹慎的對照。

在一次片段篩選中,SPR把一個感測圖乾淨、隨劑量變化的真結合物,與一個訊號嘈雜、不飽和、暴露出假象的聚集體區分開來。

一條乾淨、隨劑量變化的SPR感測曲線,確認與標靶的直接、真實結合。

SPR的獨特威力在於動力學:兩個親和力相同的化合物,其結合與解離速率可能大不相同,而長駐留時間(解離速率慢)對藥效的影響往往比單純的平衡親和力更大。

又稱
SPR表面等离子共振(SPR)表面電漿共振(SPR)