細胞生物學的方法與工具

免疫染色

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假設你想在細胞內擠作一團的成千上萬種蛋白質中,找出某一種特定蛋白質的每一個拷貝——這是在一堆針裡找一根針。免疫染色借用了人體自身的「搜索—識別」機器來解決這個難題:抗體,免疫系統的蛋白質偵探,每一種都被塑造成只去扣住某一個特定的目標。給這樣一個抗體附上一個可見的標記,你就能讓選中的那一種分子,無論它在細胞何處,都亮起來。

首先,把一種識別目標蛋白質的一抗加到已固定(保存好)的細胞上;它只與自己特定的目標結合。然後再加入攜帶螢光染料或顯色酵素的二抗,二抗會黏附到一抗上。二抗常常成倍地結合,從而放大信號,讓即使稀少的蛋白質也能顯現出來。這時在顯微鏡下,目標蛋白質就在它所處的確切位置發光或顯色,而其餘一切保持黑暗——既揭示出某蛋白質是否存在,又揭示出它究竟在細胞的哪個部位。

免疫染色是定位細胞和組織中特定分子最有力的手段之一,從科研到醫學診斷處處都在使用(例如,透過細胞攜帶哪些蛋白質來判斷癌症類型)。它的準確性完全依賴於抗體是否真正具有特異性;選得不好的抗體可能結合錯誤的對象,產出一張漂亮卻具誤導性的圖像。細胞通常必須先被殺死並固定,所以免疫染色捕捉的是一個被凍結的瞬間,而非活生生、不斷運動的過程。

一名病理學家對腫瘤樣本進行免疫染色,檢測一種只在某些癌症中出現的蛋白質;在顯微鏡下發光的細胞確認了診斷,而相鄰的健康細胞則保持黑暗。

抗體充當分子地址查找器,無論選定的那種蛋白質在哪裡,都把它點亮。

結果可靠到什麼程度,取決於抗體有多特異:非特異的抗體可能結合錯誤的蛋白質,給出令人信服卻虛假的圖像,因此良好的對照不可或缺。

又稱
immunofluorescenceimmunolabelling免疫荧光免疫標記