細胞生物學的方法與工具
螢光顯微術
/ floo-RES-ents my-KROS-koh-pee /
有些物質有一個奇妙的本領:當你用一種顏色的光照射它們時,它們會以另一種顏色發回光來,就像白襯衫在夜店的紫外燈下熠熠發亮那樣。這種發光叫做螢光。螢光顯微術正是利用這一點:把會發光的分子附著到細胞的特定部位,再點亮它們,讓唯獨那些部位在黑暗背景下明亮地發光——把一個看不見的結構變成一盞鮮明的信標。
這種會發光的分子叫做螢光團,它吸收一種波長的光(激發光),再以更長波長的光(發射光)重新放出。顯微鏡把激發光照到樣本上,並用濾色片擋住這種光,只讓發射出的光到達你的眼睛或相機。透過用發出不同顏色的螢光團去標記不同的分子——比如把細胞骨架標成綠色、細胞核標成藍色——研究者可以同時點亮好幾種結構,看清每一種究竟位於何處。
螢光顯微術是現代細胞生物學的支柱,因為它回答了單憑光學顯微術無法回答的問題:不僅是「細胞長什麼樣」,更是「這個特定的蛋白質此刻在哪裡」。它靈敏到能檢測極微量的物質,配上合適的標記還能在活細胞中工作。它的主要局限是:你只能看到自己刻意標記過的東西(未標記的一切都保持黑暗),強烈的激發光會損傷活細胞,而且光會隨時間褪去,這一現象叫做光漂白。
研究者用綠色螢光團標記細胞的肌動蛋白骨架,用藍色染料標記 DNA;在顯微鏡下,細胞核在一張精緻的綠色細絲網中發出藍光。
只有你刻意標記的分子才會亮起來;其餘一切都保持黑暗。
螢光只顯示你標記過的東西——未標記的結構是看不見的——而且長時間照光後光會褪去(光漂白),所以沒有信號並不能證明某種分子不存在。
又稱
另見