共軛焦顯微術

當你在普通螢光顯微鏡下觀察一個厚而發光的物體時，處於焦平面的那一層會被來自上方和下方、模糊失焦的一片光霧所淹沒——就像試圖在整本書都被光照透的情況下只讀其中一頁。共軛焦顯微術巧妙地把所有這些雜散光丟掉，從而讓你每次只看到來自標本某一薄層的、乾淨清晰的切片。

訣竅在於探測器前方一個叫做針孔的微小孔徑。雷射被聚焦到樣本中的單獨一點，唯有從那個精確焦點返回的光才能穿過針孔；來自焦平面上方或下方的光則被擋住。雷射讓這個點掃過樣本，從而構建出單一薄「光學切片」的一張清晰圖像。透過在不同深度採集許多切片，電腦可以把它們堆疊成整個細胞或組織的三維重建。

共軛焦顯微術之所以重要，是因為它讓研究者能夠看清厚的、三維的標本——整個細胞、胚胎、組織切片——深處的精細細節，無須把它們實際切開，而且常常能在活樣本中進行。對厚物體而言，它比普通螢光清晰得多。它的局限是：它仍受制於光學顯微術那道約 200 奈米的分辨率高牆，逐點掃描速度慢，而強烈的雷射會隨時間漂白螢光團、損傷活細胞。