細胞生物學的方法與工具

光學顯微術

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細胞遠遠小到肉眼無法看見。一個典型的動物細胞直徑約為百分之一毫米,比這句話末尾的句點還要小。光學顯微術是繞開這一難題最古老、至今仍最常用的辦法:讓普通的光穿過一片薄薄的、常常染過色的樣本,再用彎曲的玻璃透鏡把圖像放大,直到細胞大到看得見為止。正是這件工具在十七世紀首次揭示了細胞的存在。

在光學顯微鏡中,光先穿過標本,再經過一組透鏡,透鏡彎折光線,使圖像看起來更大。由於它使用可見光,所能分辨的細節受到光波長的限制:彼此靠得比約 0.2 微米(200 奈米)更近的結構會模糊成一個。這足以看清整個細胞、細胞核以及葉綠體之類的較大結構,卻看不清大多數單個細胞器的精細細節,也看不見單個分子。活細胞往往可以直接觀察,這是一大優勢。

光學顯微術之所以重要,是因為它便宜、快速,而且足夠溫和,可以觀察活細胞的日常活動——分裂、爬行、吞食養分。它無法揭示最微小的結構,而未經處理的細胞幾乎透明、難以看清,這正是染色以及相差等技巧被發明出來的原因。一個常見的誤解是:顯微鏡的用處取決於它的放大倍數;實際上取決於它的分辨率,因為把一張模糊的圖像放大,只會得到一團更大的模糊。

一名高中生物學生把一滴池塘水放到光學顯微鏡下,看著一隻單細胞的草履蟲游過視野,牠擺動的纖毛只能勉強看成一圈模糊的邊緣。

活的、未染色的細胞可以看著它們運動——但最精細的細節因可見光的極限而始終模糊。

放大倍數和分辨率不是一回事:光學顯微鏡的放大幾乎沒有上限,但它無法分辨比約 200 奈米更精細的細節,所以超過某個程度,你只是把模糊放大而已。

又稱
optical microscopy光镜光學顯微鏡技術