胺醯-tRNA 合成酶
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只有當每一個轉運 RNA 都確實攜帶它所聲稱的那種胺基酸，翻譯才能正常進行。哪怕只有一個轉運 RNA 裝錯了胺基酸，遺傳密碼仍會被正確讀出，蛋白質卻照樣出錯——就像一封地址寫得完美無誤的信封，裡面塞錯了信。胺醯-tRNA 合成酶正是防止這種情況的酶。它們的工作是把正確的胺基酸黏到正確的轉運 RNA 上，這一動作叫做給轉運 RNA「充電」（charging）。
胺醯-tRNA 合成酶是一類酶，它識別一種特定的胺基酸以及與之相配的轉運 RNA，然後利用 ATP 提供的能量，把該胺基酸結合到轉運 RNA 的尾端。細胞擁有一整套這樣的酶——大體上每種胺基酸對應一種，每一種都是細緻的「紅娘」，同時讀取胺基酸和轉運 RNA 雙方的特徵，確保它們確實般配。許多此類酶還更進一步進行校對：如果當場抓到錯誤的胺基酸，就會在它被用上之前把它水解掉，從而把總體出錯率壓低到大約幾萬分之一。
這類酶之所以重要，是因為它們才是遺傳密碼準確性的真正守護者。核糖體只檢查密碼子與反密碼子是否配對，卻無法核實掛在轉運 RNA 上的胺基酸是否正確。因此整條蛋白質的保真度，實際上繫於合成酶是否給每個轉運 RNA 正確地充了電。可以這樣總結：遺傳密碼在物理層面被「寫」了兩次——一次由密碼子與反密碼子的配對規則來寫，另一次——而且更具決定性——由每種合成酶把哪種胺基酸接到哪種轉運 RNA 上來寫。
負責胺基酸纈胺酸的那種合成酶，有時會誤抓與之非常相似的蘇胺酸。它不會讓這個錯誤矇混過關，而是把錯誤轉移到一個單獨的「編輯」口袋裡並將其剪除——這是一道內建的校對步驟，使錯誤的胺基酸進不了蛋白質。
內建的校對功能，讓這些酶能糾正自己險些犯下的錯誤。
核糖體無法判斷轉運 RNA 上的胺基酸是否正確——它只檢查密碼子與反密碼子的配對。因此，遺傳密碼的準確性主要是在合成酶的「配對」這一步才真正得到保障。