单向导 RNA

单向导 RNA 是引导 Cas9 的那段 RNA 的便捷一体化版本。在自然界中,向导由两段必须彼此找到对方的独立 RNA 构成;研究者巧妙地把它们融合成一条分子,就像把钥匙和钥匙环合并成一个顺手的整体。

单向导 RNA 把两个天然组分缝合在一起:crRNA 携带约 20 个字母的间隔序列、与 DNA 靶点配对;tracrRNA 则构成供 Cas9 抓握的支架。连成一条链后,它同时完成两项工作——指定靶点并抓住酶——因此一个可工作的 Cas9 编辑复合物只需这一条 RNA 加上蛋白即可。

这一融合在 2012 年关于可编程 Cas9 的里程碑工作中提出,使 CRISPR 的使用大为简便:更换那 20 个字母的靶向部分,就能把系统重新指向任何带合适 PAM 的位点。人们常把“向导 RNA”宽泛地用来指编辑中所用的单向导 RNA,尽管严格说来该词也涵盖天然的两段式向导。