基因组学与DNA测序
桑格测序
桑格测序是读取DNA的最初的、被奉为金标准的方法,以科学家弗雷德里克·桑格命名。其巧妙之处在于复制DNA时,偶尔在某个已知碱基处提前终止复制,从而产生一系列长度各异的片段;按长度顺序读取这些片段,就能拼出整段序列。
在该方法中,DNA聚合酶复制一条模板链,但反应体系中还含有特殊的链终止碱基,一旦掺入就会使复制停止。每种终止碱基带有不同的荧光颜色,因此当所得片段按长度分离后,仪器便能按顺序读出这些颜色,从而重建出精确的序列。
桑格测序准确度很高,能读取相当长的片段——通常一次几百个碱基——但每次反应只处理一个片段,这使它在测定整个基因组时既缓慢又昂贵。如今它仍是确认小规模结果和核查单个基因的可信选择,而大批量工作则转向了新一代测序方法。
又称
另见