基因工程与重组DNA
引物
DNA聚合酶——合成新DNA链的那种酶——无法在光秃秃的模板上从零开始,它只能延伸一条已有的链。引物就是给它提供立足点的那段起始序列:一小段核酸,与模板碱基配对,并提供一个游离末端,让合成从那里开始。
在PCR中,引物是短的、人工合成的单链DNA,通常约二十个碱基长,被设计成与目标区域两侧的序列互补。由于聚合酶只会复制引物结合位点下游的DNA,引物的选择正是使PCR具有专一性的关键:它们精确地界定了哪一段DNA会被扩增。一次典型的反应使用一对引物,每条链各一个,把待扩增的片段夹在中间。
引物不只是一种实验室工具。在正常的DNA复制中,细胞会合成短的RNA引物来启动每条新链,这些引物随后被去除并换成DNA。在实验室里,能够设计并合成与任意序列匹配的引物,正是PCR、测序以及许多其他方法之所以拥有精确、可编程靶向能力的根源。
为了从整个基因组中只扩增一个基因,科学家设计一对引物,使它们只结合在那个基因的两端,于是PCR只复制这个基因,别无其他。
精心选定的引物,把整个基因组缩成单一的靶标。
PCR引物由DNA构成,而细胞在复制时所用的引物由RNA构成,由一种叫引发酶的专门酶铺设,之后再被替换成DNA。
又称
另见