反向筛选

在初筛标出一些苗头之后，反向筛选是你专门用来抓“作弊者”的第二道测试——那些得分并非因为击中了预期靶点，而是因为愚弄了检测法或击中了不该击中之物的化合物。它是反过来问的对照问题：不是问“它有效吗？”，而是问“它是不是因为错误的原因才有效？”

反向筛选有几种类型。假象反向筛选检查对检测系统本身的干扰——例如在没有靶点的情况下运行读出化学，以抓出那些淬灭荧光或干扰信号的化合物。选择性反向筛选把苗头针对一个密切相关的脱靶（如同源的酶）测试，以标出滥交的结合物。反靶点筛选则检查针对某蛋白的活性，因为抑制该蛋白要么是不希望的，要么会过于轻易地解释掉某个表型。

按设计，一个苗头应在初筛中有活性、在相应的反向筛选中无活性；在两者中都亮起的化合物几乎总是假象或非选择性结合物，会被降级处理。反向筛选是苗头确认与分流的核心环节，把原始、含噪声的苗头清单变成一组更小的、真实且作用于靶点的化合物。