單嚮導 RNA

單嚮導 RNA 是引導 Cas9 的那段 RNA 的便捷一體化版本。在自然界中,嚮導由兩段必須彼此找到對方的獨立 RNA 構成;研究者巧妙地把它們融合成一條分子,就像把鑰匙和鑰匙環合併成一個順手的整體。

單嚮導 RNA 把兩個天然組分縫合在一起:crRNA 攜帶約 20 個字母的間隔序列、與 DNA 靶點配對;tracrRNA 則構成供 Cas9 抓握的支架。連成一條鏈後,它同時完成兩項工作——指定靶點並抓住酶——因此一個可工作的 Cas9 編輯複合物只需這一條 RNA 加上蛋白即可。

這一融合在 2012 年關於可編程 Cas9 的里程碑工作中提出,使 CRISPR 的使用大為簡便:更換那 20 個字母的靶向部分,就能把系統重新指向任何帶合適 PAM 的位點。人們常把「嚮導 RNA」寬泛地用來指編輯中所用的單嚮導 RNA,儘管嚴格說來該詞也涵蓋天然的兩段式嚮導。