基因敲入

基因敲入與剔除相反:你不是破壞一個基因,而是把新的內容寫入一個精確的位置。這就像編輯文件時不是刪詞,而是在恰當的地方插入一段選定的語句——一個標籤、一段校正後的序列,或一整個新基因。

從技術上說,敲入是在選定的基因組位置插入一段確定的 DNA 序列。常用配方是先製造一個定點切口(通常用 CRISPR-Cas9),再提供一段修復模板,其攜帶的新序列兩側帶有與周圍 DNA 匹配的區段。細胞的同源定向修復會把模板複製進去,使插入片段無縫地落在靶點。

敲入能實現多種目標:把致病突變校正回正常序列、給蛋白質接上螢光標籤以研究它的去向,或為作物或細胞系添加有用的基因。它通常比剔除更難、效率更低,因為基於模板的精確修復要與細胞更快、更粗糙的末端連接相競爭。