基因工程與重組DNA
凝膠電泳
想像一群人被要求穿過密密的灌木叢衝向終點線:身材小巧、靈活的人很快就鑽了過去,而高大的人卻被纏住、落在後頭。凝膠電泳分離DNA片段的方式與此十分相似,它按大小把混合物分開,讓你看清其中含有哪些長度的片段。
DNA被加入一塊凝膠(一種果凍狀的網眼物質)一端的樣品孔中,然後接通電場。由於DNA骨架帶負電,每個片段都被拉向正極。凝膠的網眼阻礙它們移動,較短的片段比較長的片段穿過得更快,於是隨著時間推移,片段們按長度散開,形成一條條分離的條帶。
電泳結束後,對DNA進行染色,使條帶顯現出來,再把它們的位置與一組已知大小的標準(即標記物)比較,來估算每個片段的長度。這是一種簡單而日常的技術,用來檢查酶切或PCR的結果、確認某個片段的大小,或純化某一特定條帶——堪稱分子生物學實驗室的一種基本感官。
用限制酶切開質體之後,研究者把產物在凝膠上電泳;出現兩條條帶,證實DNA被切成了兩個預期大小的片段。
條帶出現在預期位置,證實酶切如計劃般成功。
同樣的分離原理,配上合適的凝膠和條件,也適用於蛋白質和RNA;對DNA而言,瓊脂糖凝膠適合較大的片段,而更精細的聚丙烯醯胺凝膠能分辨僅相差一個鹼基的片段。
又稱
另見