勝任細菌的轉化（transformation）

你已經在試管裡造好了重組質粒。現在你需要一座活的工廠來複製它——可細菌細胞通常不會讓游離的DNA穿過它的細胞壁進來。轉化就是細菌從周圍環境中吸收DNA的那一步，而「勝任」細菌則是經過特殊處理、願意接受DNA的細胞。

多數細菌並不擅長天然吸收DNA，所以實驗室把它們製成勝任態——樂於接納DNA。經典的化學方法是把大腸桿菌浸在冰冷的氯化鈣中，這有助於帶負電的DNA貼附到細胞表面；隨後短暫的42攝氏度熱激把一部分DNA猛地推過膜。另一種方法是電穿孔，施加一個快速的高壓脈衝，在膜上打出短暫的孔，讓DNA溜進去。無論哪種方式，真正吸收質粒的細胞都只佔一小部分，但由於一個被轉化的細胞一夜之間就會分裂成數百萬個一模一樣的後代，即使成功率很低，也能給你大量攜帶你構建物的細胞。

轉化是從試管化學通向活體生物學的橋梁——你改造的DNA進入一個能複製它的細胞的那一刻。轉化之後，你把細胞塗在選擇性平板上，讓質粒上的選擇性標記只允許被轉化的細胞長成菌落。每個菌落都是一個選殖：源自同一個原始細胞的純種群，全都攜帶著你的質粒的相同拷貝。