细胞生物学的方法与工具

光学显微术

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细胞远远小到肉眼无法看见。一个典型的动物细胞直径约为百分之一毫米,比这句话末尾的句点还要小。光学显微术是绕开这一难题最古老、至今仍最常用的办法:让普通的光穿过一片薄薄的、常常染过色的样本,再用弯曲的玻璃透镜把图像放大,直到细胞大到看得见为止。正是这件工具在十七世纪首次揭示了细胞的存在。

在光学显微镜中,光先穿过标本,再经过一组透镜,透镜弯折光线,使图像看起来更大。由于它使用可见光,所能分辨的细节受到光波长的限制:彼此靠得比约 0.2 微米(200 纳米)更近的结构会模糊成一个。这足以看清整个细胞、细胞核以及叶绿体之类的较大结构,却看不清大多数单个细胞器的精细细节,也看不见单个分子。活细胞往往可以直接观察,这是一大优势。

光学显微术之所以重要,是因为它便宜、快速,而且足够温和,可以观察活细胞的日常活动——分裂、爬行、吞食养分。它无法揭示最微小的结构,而未经处理的细胞几乎透明、难以看清,这正是染色以及相差等技巧被发明出来的原因。一个常见的误解是:显微镜的用处取决于它的放大倍数;实际上取决于它的分辨率,因为把一张模糊的图像放大,只会得到一团更大的模糊。

一名高中生物学生把一滴池塘水放到光学显微镜下,看着一只单细胞的草履虫游过视野,它摆动的纤毛只能勉强看成一圈模糊的边缘。

活的、未染色的细胞可以看着它们运动——但最精细的细节因可见光的极限而始终模糊。

放大倍数和分辨率不是一回事:光学显微镜的放大几乎没有上限,但它无法分辨比约 200 纳米更精细的细节,所以超过某个程度,你只是把模糊放大而已。

又称
optical microscopy光镜光學顯微鏡技術