桑格定序

桑格定序是讀取DNA的最初的、被奉為金標準的方法，以科學家弗雷德里克·桑格命名。其巧妙之處在於複製DNA時，偶爾在某個已知鹼基處提前終止複製，從而產生一系列長度各異的片段；按長度順序讀取這些片段，就能拼出整段序列。

在該方法中，DNA聚合酶複製一條模板鏈，但反應體系中還含有特殊的鏈終止鹼基，一旦摻入就會使複製停止。每種終止鹼基帶有不同的螢光顏色，因此當所得片段按長度分離後，儀器便能按順序讀出這些顏色，從而重建出精確的序列。

桑格定序準確度很高，能讀取相當長的片段——通常一次幾百個鹼基——但每次反應只處理一個片段，這使它在測定整個基因體時既緩慢又昂貴。如今它仍是確認小規模結果和核查單個基因的可信選擇，而大批量工作則轉向了新一代定序方法。