DNA複製

DNA連接酶(DNA連接酶)

/ LY-gace /

在後隨鏈被構建成一排分立的岡崎片段之後,它仍不是一條連續的鏈——片段之間存在著微小的斷口,就像一面磚已經碼好卻尚未勾縫的牆。DNA連接酶就是給接縫勾縫的酶:它封合這些缺口,使片段變成一條完整不間斷的鏈。

更確切地說,連接酶連接的是一個切口——即兩個相鄰核苷酸並排相靠卻未發生化學成鍵之處,一側有游離的3'-OH,另一側有5'-磷酸。連接酶利用能量(許多生物中來自ATP,細菌中來自NAD+),在二者之間形成一個磷酸二酯鍵,與維繫骨架其餘部分的鍵屬同一種。一旦它在每個接合處都完成此事,原本支離破碎的鏈就被修補成一整條。

連接酶不僅在複製中不可或缺,在整個DNA生物學中都舉足輕重:在許多修復通路裡,凡需封閉骨架斷口之處,它都提供最後的封合步驟。它也是生物技術的主力——在實驗室裡,正是DNA連接酶把切下的一段DNA接入載體以製造重組DNA,名副其實地把基因黏接在一起。完成後隨鏈的那同一種化學反應,也讓我們能夠按設計構建新的DNA分子。

兩個岡崎片段相遇:...A G C T-3'OH 與 (磷酸)5'-T G C A... 在同一模板上彼此相鄰卻未連接。連接酶在該切口處形成一個磷酸二酯鍵,兩個片段便成為一條鏈。同樣的酶在選殖中把基因黏接進質粒。

連接酶形成一個骨架鍵以封合切口。

連接酶封合的是切口(一條鏈上缺一個鍵);它無法跨接缺失了核苷酸的缺口——缺口必須先由聚合酶用DNA填補,連接酶才能完成最後的封合。

又稱
ligaseDNA连接酶DNA接合酶