光學光譜法與比爾定律
紫外–可見光譜法
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我們的眼睛其實已經在做一個粗略版本:我們靠橙汁和紅酒吸收、反射的顏色把它們區分開。紫外–可見光譜法把這種能力延伸到紫外區,也就是緊挨著紫色、我們看不見的那段彩虹,並加以精確測量。
它屬於使用紫外光和可見光的分光光度法家族——波長大約從 190 到 800 奈米。分子在其電子躍遷到更高能階時吸收這些波長,因此該技術探測物質的電子結構,並通過比爾–朗伯定律探測其濃度。
紫外–可見光譜儀是化學和生物實驗室最常見的儀器之一,因為它快速、便宜、適用於溶液。它的侷限在於選擇性:許多不同的分子在彼此重疊的寬帶裡吸光,所以單憑它很難辨認混合物中的未知物。
生物學家通過測量提取出的 DNA 在 260 nm 和 280 nm 處的紫外吸光度來檢查其純度;260/280 比值接近 1.8 表示 DNA 乾淨、蛋白質污染很少。
分子生物學中每天都用的一項常規紫外–可見檢查。
普通玻璃會擋住紫外光,所以紫外測量需要石英比色皿;塑膠或玻璃比色皿只適用於可見光範圍。
又稱
另見